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原代細(xì)胞分離的具體方法如下

更新時(shí)間:2025-03-12      點(diǎn)擊次數(shù):12
  原代細(xì)胞分離是指從動(dòng)物或人體組織中直接分離出細(xì)胞,并將組織分散制成細(xì)胞懸液后從中獲取目的細(xì)胞的過程。是直接取自活組織的細(xì)胞,用于體外生長(zhǎng)。這些細(xì)胞經(jīng)歷了非常少的群體倍增,因此與連續(xù)(腫瘤或人工永生化)細(xì)胞系相比,它們更能代表所衍生組織的主要功能成分,成為更具代表性的體內(nèi)模型。
  原代細(xì)胞分離的方法
  1、機(jī)械分離法:
  主要適用于纖維組織和肌肉組織等堅(jiān)硬組織。
  操作步驟:先將樣品用鉗子或剪刀細(xì)剁成小碎片,再用組織破碎機(jī)或勻漿器等器械破碎,使細(xì)胞得以自由分散。最后通過濾網(wǎng)將細(xì)胞分離。
  2、酶消化法:
  是將組織分解成單個(gè)細(xì)胞的常用方法。
  通過選用合適酶的不同濃度、作用時(shí)間和溫度,可以使不同類型的細(xì)胞得到分離。
  常用的消化酶有膠原酶、胰蛋白酶等。
  3、貼壁法:
  主要適用于基質(zhì)附著型細(xì)胞,例如成肌細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等。
  操作步驟:將組織切成適當(dāng)大小的小塊,置于培養(yǎng)皿中,加入培養(yǎng)液。經(jīng)過一段時(shí)間后,未附著于基質(zhì)的細(xì)胞會(huì)被洗掉,貼著基質(zhì)的細(xì)胞則會(huì)繼續(xù)生長(zhǎng)。
  4、懸浮培養(yǎng)法:
  適用于以血液為基礎(chǔ)的細(xì)胞,例如淋巴細(xì)胞、白血細(xì)胞等。
  操作步驟:將血液加入離心管中,慢慢離心分離淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞等,最后將上清液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中。
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