簡(jiǎn)要描述:實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。上海伊萊博致力于臨床前藥效學(xué)CRO實(shí)驗(yàn),有著多年的實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的經(jīng)驗(yàn)。
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Real-Time PCR引物設(shè)計(jì)的要求
1Tm=55~65℃
2 GC=30~80%
3 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度:引物的產(chǎn)物大小不要太大,一般在80~300 bp之間都可。
4 引物的退火溫度要高,一般要在60 ℃以上。
五、cDNA與引物質(zhì)量檢測(cè)
選擇特異性好,擴(kuò)增效率高的引物作為實(shí)時(shí)熒光使用引物。
六、利用相對(duì)定量的方法分析目的基因表達(dá)量的情況:
常用的看家基因有B-actin,GAPDH,18S rRNA
七、定量PCR檢測(cè)
八、擴(kuò)增曲線和溶解曲線
溶解曲線全部為單峰表明為特異性擴(kuò)增,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段;熒光背暑信號(hào)階段,熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。
我們擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室、精良的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)隊(duì)包括研究員(博士后)2人,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人,主要致力于基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、生物化學(xué)、病理檢測(cè)、基因檢測(cè)等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣。通過高度細(xì)分、較好的的服務(wù)平臺(tái),為廣大客戶提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù)。目前,及,涉及臨床醫(yī)學(xué)、腫瘤生物學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)等諸多領(lǐng)域。
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