簡要描述:原代細(xì)胞來源于胚胎、組織器官及外周血,是經(jīng)特殊分離方法制備而來的原初培養(yǎng)的細(xì)胞。原代細(xì)胞分離純化是細(xì)胞培養(yǎng)工作的基礎(chǔ)。上海伊萊博致力于臨床前藥效學(xué)CRO實驗,多年的原代細(xì)胞分離純化技術(shù)服務(wù)的經(jīng)驗,為廣大藥效學(xué)實驗提供保障。
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細(xì)胞的純化
細(xì)胞的純化分為自然純化和人工純化,主要采用以下5種方法;
1.細(xì)胞因子依賴純化法:加入某些特殊的細(xì)胞因子從而使細(xì)胞達到純化,但是此方法有依賴性,加入之后每次培養(yǎng)細(xì)胞都需要因子培養(yǎng)。
2.酶消化法:利用上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞對****的耐受性不同,達到純化的目的,此方法也可對壁細(xì)胞與半貼壁及粘附細(xì)胞間的分離純化。
(1)上皮細(xì)胞與成纖維細(xì)胞的分離純化
需要在****的作用下,讓成纖維細(xì)胞先脫壁,從而得到上皮細(xì)胞。
(2)骨髓基質(zhì)肌樣細(xì)胞的純化
同樣適用酶消化法使粘附細(xì)胞脫壁分離,讓骨髓基質(zhì)細(xì)胞或血液中肌樣細(xì)胞與淋巴細(xì)胞分開和純化。
3.反復(fù)貼壁法
成纖維細(xì)胞其貼壁過程快,能在短時間內(nèi)完成附著過程,而上皮細(xì)胞在短時間內(nèi)不能附著或附著不穩(wěn)定,稍加振蕩即浮起,利用此差別可以純化細(xì)胞。
4.電烙篩選法
貼壁細(xì)胞在轉(zhuǎn)化時,細(xì)胞層中會出現(xiàn)分散的轉(zhuǎn)化灶,細(xì)胞密集、排列規(guī)則,有明顯生長趨勢,與周邊未能轉(zhuǎn)化的細(xì)胞有明顯的區(qū)域界限,可用機械刮除法去除或用電烙篩選法燙死未轉(zhuǎn)化細(xì)胞而保留轉(zhuǎn)化灶細(xì)胞。
5.機械刮除法
此方法去除不需要的細(xì)胞區(qū)域而保留需要的細(xì)胞區(qū)域,適用于上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞分離純化。
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