細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)

簡(jiǎn)要描述：人為地在融合的單層細(xì)胞上制造一個(gè)空白區(qū)域，邊緣的細(xì)胞會(huì)逐漸進(jìn)入空白區(qū)域使“劃痕"愈合，又名傷口愈合實(shí)驗(yàn)（Wound-Healing Assay）
細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)是目前測(cè)定細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)與修復(fù)能力的zcy也是zjd的方法，科研中常常用來(lái)觀察某外源因素對(duì)細(xì)胞遷移影響。

更新時(shí)間：2024-06-17
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實(shí)驗(yàn)步驟

標(biāo)記六孔板

用marker筆在六孔板底部畫平行線，平行線之間的距離0.5cm，為了保證后續(xù)拍照位置是相同的；

鋪板

細(xì)胞重懸鋪板，密度控制在第二天長(zhǎng)滿，若過(guò)夜后細(xì)胞wq長(zhǎng)滿，也可以適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間，但如果細(xì)胞密度已經(jīng)很大，盡量重新鋪板，因?yàn)榭赡苓^(guò)一天后細(xì)胞太滿，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)逐漸變差，后續(xù)細(xì)胞可能不遷移而是凋亡；

制造劃痕

第二天用直尺比著使用10ul槍頭制造劃痕，劃痕方向與標(biāo)志線垂直，最好保持力度一致，盡量一次性劃完，然后PBS沖洗3次，洗去漂浮的細(xì)胞

為了減少細(xì)胞增殖所引起的假陽(yáng)性結(jié)果，降低細(xì)胞增殖對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，將wq培養(yǎng)基換成無(wú)血清培養(yǎng)基和低血清培養(yǎng)基（FBS＜2%繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞）；

拍照

拍照前最好用PBS沖洗3次，一般認(rèn)為24h為細(xì)胞的一個(gè)周期，所以檢測(cè)時(shí)間最好不要超過(guò)一個(gè)周期的時(shí)間，按照6孔板背后畫線的垂直方向劃痕

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