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過(guò)表達(dá)腺病毒包裝 腺病毒是一種線性雙鏈DNA無(wú)包膜病毒，對(duì)分裂期細(xì)胞和非分裂期細(xì)胞均具有感染能力，且具有嗜上皮細(xì)胞性。重組腺病毒載體是以腺病毒為基礎(chǔ)發(fā)展起來(lái)的工具病毒載體，它可通過(guò)受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，但腺病毒基因組不整合進(jìn)入宿主細(xì)胞基因組中。腺病毒作為一種常用的基因操作工具，在心血管、肝臟、肌肉、肺、腫瘤及其他領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。

過(guò)表達(dá)慢病毒構(gòu)建及包裝實(shí)驗(yàn)：慢病毒（Lentivirus）載體是以 HIV-1 （人類(lèi)免疫缺陷1型病毒）為基礎(chǔ)發(fā)展起來(lái)的基因治療載體。具有感染譜廣泛、可以有效感染分裂期和靜止期細(xì)胞、長(zhǎng)期穩(wěn)定表達(dá)外源基因等優(yōu)點(diǎn)，因此成為導(dǎo)入外源基因的有力工具?，F(xiàn)在慢病毒系統(tǒng)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用到各種細(xì)胞系的基因過(guò)表達(dá)、RNA干擾、microRNA研究以及活體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中。

質(zhì)粒轉(zhuǎn)化 將質(zhì)粒 DNA 導(dǎo)入細(xì)菌的過(guò)程稱(chēng)為轉(zhuǎn)化（ Transformation ）。此感受態(tài)細(xì)菌細(xì)胞在 CaCl 2 低滲溶液中膨脹為球狀（感受態(tài)細(xì)菌的制備，見(jiàn)前）。質(zhì)粒 DNA 與 CaCl 2 形成抗 DNase 羥基 - 磷酸鈣復(fù)合物黏附于細(xì)菌表面，經(jīng) 42℃ 短時(shí)間熱沖擊處理，促進(jìn)細(xì)胞吸收 DNA 復(fù)合物。在豐富培養(yǎng)基上生長(zhǎng)數(shù)小時(shí)后，球狀細(xì)胞復(fù)原并分lie增殖。

PCR技術(shù)是模擬體內(nèi)DNA的天然復(fù)制過(guò)程，在體外擴(kuò)增DNA分子的一種分子生物學(xué)技術(shù)，主要用于擴(kuò)增位于兩段已知序列之間的DNA區(qū)段。在待擴(kuò)增的DNA片段兩側(cè)和與其兩側(cè)互補(bǔ)的兩個(gè)寡核苷酸引物，經(jīng)變性、復(fù)性和延伸若干個(gè)循環(huán)后，DNA擴(kuò)增2?倍。

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay，ELISA）是免疫學(xué)和分子生物學(xué)中廣泛使用的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)，由Eva Engvall和 Peter Perlmann 于1971 sc描述。該測(cè)定依賴(lài)于抗原-抗體相互作用的原理，并利用酶和比色檢測(cè)來(lái)量化目標(biāo)分子，主要用于檢測(cè)和量化生物樣品中特定蛋白質(zhì)、肽、抗體或抗原的存在。ELISA測(cè)定通常應(yīng)用于各個(gè)領(lǐng)域，包括臨床

免疫印跡（immunoblotting）又稱(chēng)蛋白質(zhì)印跡（Western blotting），是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測(cè)復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測(cè)定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測(cè)定的高特異性和敏感性，現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對(duì)蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，CoIP）是研究蛋白-蛋白間相互作用的經(jīng)典方法，屬于免疫沉淀技術(shù)的一類(lèi)，常被用于鑒定特定蛋白復(fù)合物的中未知蛋白組分。免疫共沉淀的設(shè)計(jì)理念是，假設(shè)一種已知蛋白是某個(gè)大的蛋白復(fù)合物的組成成員，那么利用這種蛋白的特異性抗體，就可能將整個(gè)蛋白復(fù)合物從溶液中“拉”下來(lái)（常說(shuō)的“pull-down”），進(jìn)而可以用于鑒定這個(gè)蛋白復(fù)合物中的其他未知成員

外泌體示蹤是由活細(xì)胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡，具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)；參與細(xì)胞之間的交流，物質(zhì)的運(yùn)輸以及正常生理過(guò)程的維持，此外還與疾病的產(chǎn)生有關(guān)。外泌體內(nèi)吞示蹤是用示蹤劑 (如有機(jī)染料、熒光蛋白、造影劑、核素等) 標(biāo)記外泌體，用特定的影像學(xué)方法對(duì)動(dòng)物體內(nèi)外泌體進(jìn)行追蹤，從而觀察外泌體在體內(nèi)的生物學(xué)行為和檢測(cè)靶細(xì)胞內(nèi)吞外泌體的情況，并有助于對(duì)外泌體的功能進(jìn)行進(jìn)一步的研究。