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流式鈣離子濃度檢測技術(shù)服務(wù)

簡要描述:流式鈣離子濃度檢測技術(shù)服務(wù):Fluo-3-Am為一新型的高度特異性Ca2+熒光指示劑,可以靈敏地反映細胞內(nèi)游離鈣離子濃度的變化,F(xiàn)luo-3-Am進入細胞后經(jīng)非特異性酯酶脫去Am酯,成為脂溶的Fluo-3留在細胞內(nèi),當Fluo-3與細胞內(nèi)游離鈣結(jié)合后,其熒光強度是Fluo-3本身的40倍以上,當用480nm波長激發(fā)時,其熒光強度與游離鈣離子濃度成正比。

  • 更新時間:2023-10-30
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流式鈣離子濃度檢測技術(shù)服務(wù)1、鈣熒光探針負載;取細胞懸液,加Fluo-3-Am至10umol/L,置二氧化碳培養(yǎng)箱中孵育1h,其間輕微振蕩3次。離心,去掉多余的染料,再用無鈣緩沖液反復(fù)洗滌3次,最后用無鈣緩沖液稀釋。

2、隨機測定每管細胞懸液樣品(以下簡稱樣品)的單個細胞的熒光強度,記為F值,

3、加入10%TritonX100,(破膜用):加入1mmol兒氯化鈣,吹打均勻,解育1~10min.測定熒光即Fmax佰

4、加入EDTA,20ul(鈣鰲合劑),孵育1~10min,激發(fā)波長488nm測定熒光.即Fmin值,加0.1%friton是增加膜通透性使細胞外Ca2+進入細胞內(nèi),作為最大值。加EGTA是為了螯合Ca2+,作為最小值生理環(huán)境中細胞內(nèi)鈣離子濃度遠低干細胞外液(大約1:10000),細胞膜對鈣的通透性變化對細胞內(nèi)鈣影響很大流式細胞術(shù)是一種高靈敏度的自動分析細胞的高新技術(shù),快速而大量地檢測單個細胞是它的一大特點,用流式細胞術(shù)可以擯棄原子吸收光譜法測定組織鈣不能區(qū)別細胞內(nèi)外Ca2+含最之不足,也不似其他方法操作過干繁雜,由干流式細胞術(shù)一次測量細胞數(shù)量大,故測定結(jié)果較為準確,誤差小。更由于在活的細胞中進行測定,極有助于生命科學中Ca2+的研究,

流式鈣離子濃度檢測技術(shù)服務(wù)

我們擁有專業(yè)的實驗室、精良的實驗設(shè)備和經(jīng)驗豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團隊包括研究員(博士后)2人,助理研究員(博士)4人,核心研究員(碩士)15人,主要致力于基因組學、轉(zhuǎn)錄組學、蛋白質(zhì)組學、代謝組學、生物化學、病理檢測、基因檢測等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣。通過高度細分、較好的的服務(wù)平臺,為廣大客戶提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù)。目前,及,涉及臨床醫(yī)學、腫瘤生物學、免疫學、細胞生物學、分子生物學等生命科學、醫(yī)學等諸多領(lǐng)域。


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